New methods for the determination of seleno-proteins in human plasma/serum were developed by coupling miniaturized affinity HPLC systems to ORS-ICP-MS and ICP-SFMS detectors. A methods interlaboratory comparison allowed to provide for the first time the indicative reference concentration of individual seleno-proteins in the commercially available BCR-637 human serum. Two methods for seleno-proteins speciation in plasma/serum where applied to investigate their distribution in patients affected by type II diabetes and colorectal cancer, compared to healthy individuals. A new method was then developed for the speciation analysis of Se in rat colon tissues, based on two-dimensional HPLC coupled to ICP-QMS. Five species of Se were isolated, among which glutathione peroxidases 1 and 2, and thioredoxin reductase 1 were potentially identified by MALDI-TOF-MS. The method was transferred to human samples obtaining promising preliminary results.
Sono stati sviluppati nuovi metodi per la determinazione delle seleno-proteine in plasma/siero umani mediante accoppiamento di sistemi miniaturizzati di HPLC di affinità e detector ORS-ICP-MS e ICP-SFMS. Un confronto interlaboratorio tra metodi ha consentito di stimare per la prima volta la concentrazione di riferimento di seleno-proteine nel siero umano commerciale BCR-637. Due metodi per la speciazione di seleno-proteine in plasma/siero sono stati applicati per investigare la loro distribuzione in pazienti affetto da diabete di tipo II e cancro colonrettale, in confronto a soggetti sani. Un nuovo metodo è stato poi sviluppato per la speciazione delle seleno-proteine in tessuti di colon di ratto, basati su HPLC bidimensionale accoppiata con ICP-QMS. Cinque specie del selenio sono state isolate, tra cui glutatione perossidasi 1 e 2, e tioredoxina reduttasi 1 sono state potenzialmente identificate mediante MALDI-TOF-MS. I metodo è stato trasferito a campioni umani ottenendo promettenti risultati preliminari.
